آمار
| تعداد نشریات | 39 |
| تعداد شماره‌ها | 1,175 |
| تعداد مقالات | 8,460 |
| تعداد مشاهده مقاله | 6,348,417 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,599,565 |
بهینه سازی و بیان ژن طراحی شده stxA واجد سه جهش هدفمند (E167Q-A231D-G234E) شیگلا دیسانتری و تخلیص آن | ||
| علوم و فناوریهای پدافند نوین | ||
| مقاله 6، دوره 3، شماره 1 - شماره پیاپی 7، فروردین 1391، صفحه 49-55 اصل مقاله (2.94 M) | ||
| نویسندگان | ||
| غلامرضا اولاد* 1؛ محمود تولایی2؛ فیروز ابراهیمی3؛ جعفر امانی4؛ علی محمد لطیفی4 | ||
| 11-مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله 2-مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه امام حسین(ع) | ||
| 2- مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج | ||
| 3- مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه امام حسین(ع) | ||
| 4- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج | ||
| تاریخ دریافت: 10 بهمن 1397، تاریخ بازنگری: 14 اردیبهشت 1403، تاریخ پذیرش: 10 بهمن 1397 | ||
| چکیده | ||
| چکیده: هدف: شیگلا دیسانتری با تولید سم stx (با دو زیر واحد AوB) یکی از مهمترین باکتریهای بیماریزا‌ی روده ای برای انسان است. این سم با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی خواهد شد. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن ، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در دستیابی به پروتئین نوترکیب از نوع stxA وجود دارد.هدف از این مطالعه، طراحی ژن stxA موتانت و تولید پروتئین بیانی آن بعنوان کاندید واکسن علیه شیگاتوکسین جهت بررسی ایمنی زایی آن در مطالعات بعدی می باشد. روش ها: پس از طراحی و تهیه ژن سنتتیک pET28a/stxA موتانت(G234E - E167Q -A231D) ، واکنش PCR جهت کنترل صحت حضور این ژن انجام گردید. پس از انتقال این وکتور به سلول میزبان Bl21 DE3 ، بیان، بهینه سازی و نهایتا تخلیص پروتئین حاصل بررسی گردید. یافته ها: نتیجه مطالعات اولیه، منجر به طراحی ژن stxA موتانت گردید. نتایج واکنش PCR با استفاده از پلاسمید سنتتیک نشان از صحت ژن مورد مطالعه داشت. سپس بیان این ژن در سلول میزبان Bl21 DE3، بهینه سازی گردید که درنتیجه تولید مقادیر زیادی از این پروتئین به شکل اجسام توده ای نشان داده شد. تخلیص انکلوژن بادی و سپس محلول سازی پروتئین های آن از روش های تلفیقی صورت گرفت. بحث و نتیجه گیری نهایی : با توجه به مکانیسم اثر شیگاتوکسین پیش بینی می شود که این پروتئین موتانت دارای اثر سمیت کمتری نسبت به سایر موتانت های قبلی کاندید واکسن داشته باشد، در نتیجه می تواند به عنوان کاندید واکسن برتر مطرح گردد | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| کلید واژگان : stxA موتانت؛ واکسن نوترکیب ؛ شیگاتوکسین؛ بهینه سازی بیان | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 326 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 134 |
||